飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer) 所屬目錄:生化試劑 搜索關(guān)鍵字:飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer) 信息簡(jiǎn)介:飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer) |
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“飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer)”參數(shù)說明
“飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer)”詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
>>快速轉(zhuǎn)膜液使用獨(dú)特配方,能高效快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。使用濕轉(zhuǎn)法(Tank blot)或半干轉(zhuǎn)法(Semi-dry blot)方法,能在15-35分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)膜過程。 >>快速和環(huán)保:快速轉(zhuǎn)膜液不使用甲醇,減輕了對(duì)實(shí)驗(yàn)者和環(huán)境的傷害。 >>兼容性好:快速轉(zhuǎn)膜液能兼容Laemmli膠,預(yù)制膠,Bis-Tris膠等多種凝膠。 >>轉(zhuǎn)移效率高:快速轉(zhuǎn)膜液對(duì)分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉(zhuǎn)移效率,有效解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時(shí)轉(zhuǎn)移的問題。 轉(zhuǎn)膜前的準(zhǔn)備: 5-6張裁好的濾紙;裁好的轉(zhuǎn)印膜;足夠的1×快速轉(zhuǎn)移buffer 一 濕轉(zhuǎn)法(Tank blot): 1 按照下表配制1×快速轉(zhuǎn)膜液
2 將濾紙和海綿浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中,完全浸濕。 3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS;隨后將凝膠浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中。 注意:水中漂洗時(shí)間一定不能超過2分鐘,否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。 4 按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu): 負(fù)極(陰極) 一塊海綿 2mm濾紙 凝膠 轉(zhuǎn)印膜 1mm濾紙 一塊海綿(根據(jù)三明治的厚度選擇是否使用) 正極(陽極) 注意:?= 1 \* GB3 ① 要徹底清除三明治結(jié)構(gòu)中的氣泡,適當(dāng)補(bǔ)加1×快速轉(zhuǎn)膜液保持三明治結(jié)構(gòu)濕潤(rùn)。 = 2 \* GB3 ② PVDF膜使用前要用無水甲醇潤(rùn)濕30秒。 = 3 \* GB3 ③ 三明治結(jié)構(gòu)的制作不能太緊,也不能太松。太緊和太松都會(huì)影響轉(zhuǎn)印效果。如果太緊的話,可以去除陽極一側(cè)的海綿或?yàn)V紙。 5 將三明治結(jié)構(gòu)放于轉(zhuǎn)移槽中。 注:轉(zhuǎn)移槽中可以不用1×快速轉(zhuǎn)膜液,可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)電泳緩沖液取代。三明治結(jié)構(gòu)中的快速轉(zhuǎn)膜液足夠保證轉(zhuǎn)膜的完成。 二 半干轉(zhuǎn)(Semi-dry blot): 1 按照下表配制1×快速轉(zhuǎn)膜液:
將濾紙浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中,完全浸濕。 3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS;隨后將凝膠浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中。 注意:水中漂洗時(shí)間一定不能超過2分鐘,否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。 4 按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu): 負(fù)極(陰極) 下層濾紙 凝膠 轉(zhuǎn)印膜 上層濾紙 正極(陽極) 半干轉(zhuǎn)時(shí),濾紙、膠、膜之間的大小,一般是下層濾紙>=膜>=膠>=上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸;濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會(huì)造成短路。 注意:PVDF膜使用前要用無水甲醇潤(rùn)濕30秒。 三 轉(zhuǎn)移條件: 推薦使用恒流轉(zhuǎn)移
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 *Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途! |
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