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飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer)

所屬目錄:生化試劑

搜索關(guān)鍵字:飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer)

信息簡(jiǎn)介:飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer)

詳細(xì)信息:
“飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer)”參數(shù)說明
是否有現(xiàn)貨: 認(rèn)證: 飛凈 Phygene
級(jí)別: 超純、高純 用途: 實(shí)驗(yàn)室
含量: 標(biāo)準(zhǔn)品 應(yīng)用: 科學(xué)研究
型號(hào): PH0403 規(guī)格: 500ml
商標(biāo): 飛凈 Phygene 包裝:
產(chǎn)量: 3124
“飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液(Rapid Transfer buffer)”詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

>>快速轉(zhuǎn)膜液使用獨(dú)特配方,能高效快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。使用濕轉(zhuǎn)法(Tank blot)或半干轉(zhuǎn)法(Semi-dry blot)方法,能在15-35分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)膜過程。

>>快速和環(huán)保:快速轉(zhuǎn)膜液不使用甲醇,減輕了對(duì)實(shí)驗(yàn)者和環(huán)境的傷害。

>>兼容性好:快速轉(zhuǎn)膜液能兼容Laemmli膠,預(yù)制膠,Bis-Tris膠等多種凝膠。

>>轉(zhuǎn)移效率高:快速轉(zhuǎn)膜液對(duì)分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉(zhuǎn)移效率,有效解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時(shí)轉(zhuǎn)移的問題。
使用說明:

轉(zhuǎn)膜前的準(zhǔn)備:

5-6張裁好的濾紙;裁好的轉(zhuǎn)印膜;足夠的1×快速轉(zhuǎn)移buffer

一 濕轉(zhuǎn)法(Tank blot):

1 按照下表配制1×快速轉(zhuǎn)膜液

—— 1×快速轉(zhuǎn)膜液配制量
100?ml 500?ml 1000?ml
10×快速轉(zhuǎn)膜液 10?ml 50?ml 100?ml
無水乙醇 20?ml 100?ml 200?ml
超純水 70?ml 350?ml 700?ml

2 將濾紙和海綿浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中,完全浸濕。

3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS;隨后將凝膠浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中。

注意:水中漂洗時(shí)間一定不能超過2分鐘,否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。

4 按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu):

負(fù)極(陰極)

一塊海綿

2mm濾紙

凝膠

轉(zhuǎn)印膜

1mm濾紙

一塊海綿(根據(jù)三明治的厚度選擇是否使用)

正極(陽極)

注意:?= 1 \* GB3 ① 要徹底清除三明治結(jié)構(gòu)中的氣泡,適當(dāng)補(bǔ)加1×快速轉(zhuǎn)膜液保持三明治結(jié)構(gòu)濕潤(rùn)。

= 2 \* GB3 ② PVDF膜使用前要用無水甲醇潤(rùn)濕30秒。

= 3 \* GB3 ③ 三明治結(jié)構(gòu)的制作不能太緊,也不能太松。太緊和太松都會(huì)影響轉(zhuǎn)印效果。如果太緊的話,可以去除陽極一側(cè)的海綿或?yàn)V紙。

5 將三明治結(jié)構(gòu)放于轉(zhuǎn)移槽中。

注:轉(zhuǎn)移槽中可以不用1×快速轉(zhuǎn)膜液,可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)電泳緩沖液取代。三明治結(jié)構(gòu)中的快速轉(zhuǎn)膜液足夠保證轉(zhuǎn)膜的完成。

二 半干轉(zhuǎn)(Semi-dry blot):

1 按照下表配制1×快速轉(zhuǎn)膜液:

—— 1×快速轉(zhuǎn)膜液配制量
100?ml 500?ml 1000?ml
10×快速轉(zhuǎn)膜液 10?ml 50?ml 100?ml
無水乙醇 20?ml 100?ml 200?ml
超純水 70?ml 350?ml 700?ml

將濾紙浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中,完全浸濕。

3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS;隨后將凝膠浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中。

注意:水中漂洗時(shí)間一定不能超過2分鐘,否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。

4 按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu):

負(fù)極(陰極)

下層濾紙

凝膠

轉(zhuǎn)印膜

上層濾紙

正極(陽極)

半干轉(zhuǎn)時(shí),濾紙、膠、膜之間的大小,一般是下層濾紙>=膜>=膠>=上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸;濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會(huì)造成短路。

注意:PVDF膜使用前要用無水甲醇潤(rùn)濕30秒。

三 轉(zhuǎn)移條件:

推薦使用恒流轉(zhuǎn)移

電流 轉(zhuǎn)移時(shí)間
300?mA 30?to?35?min
330?mA 25?to?30?min
350?mA 25?to?30?min
375?mA 20?to?25?min
400?mA 15?to?20?min
注意事項(xiàng):
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

*Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途!

信息編輯:宜賓飛凈生物科技有限公司   字號(hào):
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