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“飛凈 Phygene DAB辣根過氧化物酶顯色試劑盒”參數(shù)說明
“飛凈 Phygene DAB辣根過氧化物酶顯色試劑盒”詳細介紹
產(chǎn)品簡介:
DAB辣根過氧化物酶顯色液(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一種依據(jù)辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合顯色,用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜顯色的試劑盒。DAB即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride, 是辣根過氧化物酶的常用底物。本顯色液可以用于細胞或組織在免疫組化或原位雜交時結(jié)合的辣根過氧化物酶顯色,也可用于Western等結(jié)合有辣根過氧化物酶的膜的顯色檢測 使用參考: 1、常規(guī)組織切片、細胞樣品、膜與辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當(dāng)洗滌液洗滌3~5次。? 2、按(A):試劑(B):試劑(C)=5000:5000:3的比例混合,?即為DAB染色工作液,即配即用。? 3、洗滌過組織后,去除洗滌液,加入適量DAB染色工作液,確保覆蓋樣品。? 4、室溫避光孵育或更長時間,直至顯色至預(yù)期深淺。? 5、去除DAB染色工作液,用蒸餾水清洗1~2次即可終止顯色反應(yīng)。? 6、對組織切片或細胞樣品,反應(yīng)終止后,如有必要可用中性紅染色液染色,便于觀察。對于膜染色,反終止后可室溫晾干避光保存。 2、 試劑(A)、試劑(B)避免反復(fù)凍融。 3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 1、?背景顯色太深? ①?在免疫組化時如果背景顯色太深,考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進行封閉,例如選購適當(dāng)?shù)姆忾]液或使用和一抗相同來源的血清(10%)進行封閉。? ②?在進行含內(nèi)源性過氧化氫酶的免疫組化時,如果背景顯色太深,需注意滅活內(nèi)源性過氧化氫酶。? ③可以考慮縮短顯色時間,或降低二抗?jié)舛取? ④?選擇適當(dāng)強度的洗滌液,或延長洗滌時間。? 2、沒有顯色或顯色太弱? ①當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。檢測二抗效果,滴一滴稀釋二抗在膜上,檢測二抗是否可以被正常顯色。? ②考慮使用更加靈敏的放大檢測體系,例如使用生物素檢測體系。 ③適當(dāng)延長顯色時間,另外確定抗原修復(fù)是否對于使用的一抗是必需的。 *Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途! |
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