飛凈 Phygene TMB顯色液(ELISA HRP顯色用) 所屬目錄:生化試劑 搜索關(guān)鍵字:飛凈 Phygene TMB顯色液(ELISA HRP顯色用) 信息簡(jiǎn)介:飛凈 Phygene TMB顯色液(ELISA HRP顯色用) |
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“飛凈 Phygene TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)”詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
TMB,即3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine,是辣根過(guò)氧化物酶的常用底物。在辣根過(guò)氧化物酶或其他適當(dāng)過(guò)氧化物酶的催化下,TMB 會(huì)產(chǎn)生可溶性藍(lán)色產(chǎn)物。藍(lán)色產(chǎn)物通??梢栽?370nm 或 nm 測(cè)定吸光度。加入**后,溶液呈黃色,此時(shí)可以在 450nm測(cè)定吸光度。本試劑盒常用于 ELISA 檢測(cè),也可以用于檢測(cè)血液或血紅蛋白等樣品中的過(guò)氧化物酶含量。用于 ELISA 檢測(cè)時(shí),每個(gè)樣品通常使用 0.2 毫升顯色液。 本顯色劑采用最新的顯色技術(shù),把所有的相關(guān)試劑全部配制在單一溶液中,僅由單一溶液組成,簡(jiǎn)化了操作步驟,使檢測(cè)更加穩(wěn)定可靠。 1. 根據(jù)參考ELISA 試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟,在與辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體孵育后,用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。 2. 經(jīng)HRP標(biāo)記物孵育并充分洗滌后,酶標(biāo)板每孔加入 200ul TMB 顯色液。 3. 室溫避光孵育 3-30 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間(可長(zhǎng)達(dá) 24 小時(shí)),直至顯色至預(yù)期深淺。 4. 加入50 微升2M H2SO4 終止反應(yīng),隨后在 450nm測(cè)定吸光度。 1. 背景顯色太深。 如果背景(沒(méi)有樣品的對(duì)照孔)顯色太深,一方面需考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進(jìn)行封閉,另一方面可以考慮縮短顯色時(shí)間,或降低二抗?jié)舛取A硗?,選擇適當(dāng)強(qiáng)度的洗滌液,或延長(zhǎng)洗滌時(shí)間也會(huì)有所幫助。 2. 沒(méi)有顯色或顯色太弱。 a. 適當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。檢測(cè)二抗效果,滴一滴稀釋二抗在離心管內(nèi),檢測(cè)二抗是否可以被正常顯色。 b. 可以考慮使用更加靈敏的放大檢測(cè)體系,例如使用生物素檢測(cè)體系。 c. 可以適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間。 注意事項(xiàng): 1)TMB 對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。 2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 *Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途! |
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