飛凈 Phygene 紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer) 所屬目錄:生化試劑 搜索關(guān)鍵字:飛凈 Phygene 紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer) 信息簡(jiǎn)介:飛凈 Phygene 紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer) |
詳細(xì)信息: |
“飛凈 Phygene 紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)”參數(shù)說(shuō)明
“飛凈 Phygene 紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)”詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
紅細(xì)胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也稱ACK Lysis Buffer,是一種用于從人或鼠等的血液或組織樣品中裂解并去除無(wú)細(xì)胞核紅細(xì)胞的溶液。 本裂解液經(jīng)過(guò)優(yōu)化配方,在裂解紅細(xì)胞的同時(shí)幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。 本裂解液的主要有效成分為氯化銨。 本裂解液不適用于有細(xì)胞核紅細(xì)胞的裂解,例如鳥或禽類的紅細(xì)胞。 本裂解液經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理,處理過(guò)的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè)。 對(duì)于組織細(xì)胞樣品: 1. 新鮮組織經(jīng)過(guò)膠原酶或胰酶等消化處理,通過(guò)適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液,離心棄上清。 2. 加入3-5倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解1-2分鐘。例如細(xì)胞沉淀的體積為1ml,則加入3-5ml的紅細(xì)胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作均可。 3. 400-500g離心5分鐘,棄紅色上清。4℃離心效果更佳。 4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全,可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。 5. 洗滌1-2次:加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液,重懸沉淀,400-500g離心2-3分鐘,棄上清。可再重復(fù)1次,共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。4℃離心效果更佳。 6. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 對(duì)于組織細(xì)胞樣品無(wú)需洗滌的快速操作步驟: 1. 新鮮組織經(jīng)過(guò)膠原酶或胰酶等消化處理,通過(guò)適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液,離心棄上清。 2. 對(duì)于0.2ml細(xì)胞沉淀加入1ml紅細(xì)胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解1-2分鐘。本步驟在室溫或4度操作均可。 3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液,混勻。 4. 400-500g離心5分鐘,棄紅色上清。4℃離心效果更佳。 5. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全,可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。 6. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 ?說(shuō)明:對(duì)于常規(guī)步驟,多一步洗滌過(guò)程中的離心,但可以節(jié)省洗滌液的用量,并且洗滌效果也更好一些,同時(shí)不需要大體積的離心管??焖俨襟E少了一次離心,但洗滌效果略差一些,同時(shí)需要大體積的離心管。 對(duì)于血液樣品: 1. 取新鮮抗凝血,400-500g離心5分鐘,離心棄上清。 2. 加入6-10倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解1-2分鐘。例如細(xì)胞沉淀的體積為1ml,則加入6-10ml的紅細(xì)胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作均可。注意:對(duì)于鼠的血液,裂解1-2分鐘已經(jīng)足夠,對(duì)于人的外周血,宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至4-5分鐘,并且裂解過(guò)程中宜適當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。 3. 400-500g離心5分鐘,棄紅色上清。4℃離心效果更佳。 4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全,可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。 5. 洗滌1-2次:加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液,重懸沉淀,400-500g離心2-3分鐘,棄上清??稍僦貜?fù)1次,共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。4℃離心效果更佳。 6. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 對(duì)于血液樣品無(wú)需洗滌的快速操作步驟: 1. 每1ml新鮮抗凝血中加入10ml紅細(xì)胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解4-5分鐘。本步驟在室溫或4度操作均可。注意:對(duì)于鼠的血液,裂解4-5分鐘已經(jīng)足夠,對(duì)于人的外周血,宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至10分鐘,但通常不宜超過(guò)15分鐘,并且裂解過(guò)程中宜適當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。 2. 加入20-30ml PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液,混勻。 3. 400-500g離心5分鐘,棄紅色上清。4℃離心效果更佳。 4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全,可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。 5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 說(shuō)明:對(duì)于常規(guī)步驟,多一步洗滌過(guò)程的離心,但可以節(jié)省洗滌液的用量,并且洗滌效果也更好一些,同時(shí)不需要大體積的離心管。快速步驟少了一次離心,但洗滌效果略差一些,同時(shí)需要大體積的離心管。 *Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途! |
||||||||||||||||||||||
信息編輯:宜賓飛凈生物科技有限公司 字號(hào):大 中 小 |
上一條:飛凈 Phygene Western一抗稀釋液 | 下一條:飛凈 Phygene RIPA裂解液(弱) RIPA Lysis Buffer (Mild) |