飛凈 Phygene 高純質(zhì)粒小提試劑盒PurePlasmid Mini Kit 所屬目錄:生化試劑 搜索關(guān)鍵字:飛凈 Phygene 高純質(zhì)粒小提試劑盒PurePlasmid Mini Kit 信息簡(jiǎn)介:飛凈 Phygene 高純質(zhì)粒小提試劑盒PurePlasmid Mini Kit |
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“飛凈 Phygene 高純質(zhì)粒小提試劑盒PurePlasmid Mini Kit”詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒采用飛凈經(jīng)典的堿裂解法裂解細(xì)菌,再通過(guò)離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合DNA的特性,可以從1–5ml大腸桿菌LB培養(yǎng)液中快速提取3–20μg純凈的高拷貝質(zhì)粒DNA。提取的質(zhì)??蛇m用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測(cè)序、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。然而,對(duì)質(zhì)粒純度要求更高的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)(要求無(wú)內(nèi)毒素),此試劑盒不能達(dá)到要求。另外,盡管該試劑盒可以抽提較大的質(zhì)粒(>10kb),但我們不推薦使用。如果一定要使用,請(qǐng)參考以下方法:加大菌體使用量(使用5–10 ml過(guò)夜培養(yǎng)物),同時(shí)按照比例增加P1、P2、P3的用量;洗脫緩沖液應(yīng)在70℃預(yù)熱,在吸附和洗脫時(shí)可以適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng)時(shí)間,以增加提取效率,其它步驟相同。 產(chǎn)品特點(diǎn) 1)使用了Lysis Dye,菌體裂解是否完全一目了然。由于判斷菌體裂解和中和是否徹底更主要取決于操作者的經(jīng)驗(yàn),所以我們?cè)黾恿薒ysis Dye(一種能使裂解/中和體系變換顏色的試劑)來(lái)幫助觀察裂解/中和的程度。加入P1后,Lysis Dye使菌液變?yōu)闇啙岬募t色;加入P2后,Lysis Dye立即使溶液變?yōu)槌吻宓募t色,裂解是否完全只要觀察紅色溶液是否澄清,如果紅色非常均一,表明裂解充分;在完全裂解的體系中加入P3混勻后,體系立即變?yōu)辄S色,任何紅色的殘留表明沒(méi)有完全混勻或者中和不徹底。 2 )增加了去蛋白液PD,能更加徹底地去除蛋白污染,得到純度更高的質(zhì)粒。 準(zhǔn)備工作1. 將試劑盒附帶的RNase A全部加入到溶液P1中(如15ml P1中加入150μl RNase A),混勻后4℃貯存。 2. 按照標(biāo)簽所示在漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇,混勻后蓋緊瓶蓋后室溫貯存?zhèn)溆谩?/p> 3. 每次使用前請(qǐng)檢查溶液P2,溶液P3和去蛋白液PD是否有沉淀生成,如果出現(xiàn)沉淀,37℃溫浴至沉淀溶解后再使用。 *Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途! |
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