飛凈 Phygene 10×快速轉(zhuǎn)膜液（Rapid Transfer buffer）
| 是否有現(xiàn)貨： | 是 | 認證： | 飛凈 Phygene |
| 級別： | 超純、高純 | 用途： | 實驗室 |
| 含量： | 標準品 | 應(yīng)用： | 科學(xué)研究 |
| 型號： | PH0403 | 規(guī)格： | 500ml |
| 商標： | 飛凈 Phygene | 包裝： | 瓶 |
| 產(chǎn)量： | 3124 |
>>快速轉(zhuǎn)膜液使用獨特配方，能高效快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。使用濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）或半干轉(zhuǎn)法（Semi-dry blot）方法，能在15-35分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)膜過程。
>>快速和環(huán)保：快速轉(zhuǎn)膜液不使用甲醇，減輕了對實驗者和環(huán)境的傷害。
>>兼容性好：快速轉(zhuǎn)膜液能兼容Laemmli膠，預(yù)制膠，Bis-Tris膠等多種凝膠。
>>轉(zhuǎn)移效率高：快速轉(zhuǎn)膜液對分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉(zhuǎn)移效率，有效解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時轉(zhuǎn)移的問題。
使用說明:
轉(zhuǎn)膜前的準備：
5-6張裁好的濾紙；裁好的轉(zhuǎn)印膜；足夠的1×快速轉(zhuǎn)移buffer
一 濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）：
1 按照下表配制1×快速轉(zhuǎn)膜液
| —— | 1×快速轉(zhuǎn)膜液配制量 | ||
| 100?ml | 500?ml | 1000?ml | |
| 10×快速轉(zhuǎn)膜液 | 10?ml | 50?ml | 100?ml |
| 無水乙醇 | 20?ml | 100?ml | 200?ml |
| 超純水 | 70?ml | 350?ml | 700?ml |
2 將濾紙和海綿浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。
3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中。
注意：水中漂洗時間一定不能超過2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。
4 按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)：
負極（陰極）
一塊海綿
2mm濾紙
凝膠
轉(zhuǎn)印膜
1mm濾紙
一塊海綿（根據(jù)三明治的厚度選擇是否使用）
正極（陽極）
注意：?= 1 \* GB3 ① 要徹底清除三明治結(jié)構(gòu)中的氣泡，適當補加1×快速轉(zhuǎn)膜液保持三明治結(jié)構(gòu)濕潤。
= 2 \* GB3 ② PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒。
= 3 \* GB3 ③ 三明治結(jié)構(gòu)的制作不能太緊，也不能太松。太緊和太松都會影響轉(zhuǎn)印效果。如果太緊的話，可以去除陽極一側(cè)的海綿或濾紙。
5 將三明治結(jié)構(gòu)放于轉(zhuǎn)移槽中。
注：轉(zhuǎn)移槽中可以不用1×快速轉(zhuǎn)膜液，可以用1×TGS（Tris-Glycine-SDS）電泳緩沖液取代。三明治結(jié)構(gòu)中的快速轉(zhuǎn)膜液足夠保證轉(zhuǎn)膜的完成。
二 半干轉(zhuǎn)（Semi-dry blot）：
1 按照下表配制1×快速轉(zhuǎn)膜液：
| —— | 1×快速轉(zhuǎn)膜液配制量 | ||
| 100?ml | 500?ml | 1000?ml | |
| 10×快速轉(zhuǎn)膜液 | 10?ml | 50?ml | 100?ml |
| 無水乙醇 | 20?ml | 100?ml | 200?ml |
| 超純水 | 70?ml | 350?ml | 700?ml |
將濾紙浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。
3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中。
注意：水中漂洗時間一定不能超過2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。
4 按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)：
負極（陰極）
下層濾紙
凝膠
轉(zhuǎn)印膜
上層濾紙
正極（陽極）
半干轉(zhuǎn)時，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙>=膜>=膠>=上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會造成短路。
注意：PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒。
三 轉(zhuǎn)移條件：
推薦使用恒流轉(zhuǎn)移
| 電流 | 轉(zhuǎn)移時間 |
| 300?mA | 30?to?35?min |
| 330?mA | 25?to?30?min |
| 350?mA | 25?to?30?min |
| 375?mA | 20?to?25?min |
| 400?mA | 15?to?20?min |
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
*Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途！