是否有現(xiàn)貨: | 是 | 認(rèn)證: | 飛凈 Phygene |
級(jí)別: | 超純、高純 | 用途: | 實(shí)驗(yàn)室 |
含量: | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 應(yīng)用: | 科學(xué)研究 |
型號(hào): | PH0218 | 規(guī)格: | 50T | 100T |
商標(biāo): | 飛凈 Phygene | 包裝: | 盒 |
產(chǎn)量: | 1052 |
本試劑盒適合于從褐土、淤泥、火山灰等各種極端土壤環(huán)境中提取微生物 DNA。對(duì)土壤中各種細(xì)菌、真菌有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物DNA的多態(tài)性。?
本試劑盒采用我公司特有的腐殖質(zhì)吸附材料,可高效專(zhuān)一的去除各種腐殖質(zhì)成分而絲毫不會(huì)影響DNA的產(chǎn)率,純度較酚、氯仿抽提法提高數(shù)倍。?
使用本試劑盒提取的DNA產(chǎn)量大、完整性好,可直接用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR 、文庫(kù)構(gòu)建、Southern? 雜交等實(shí)驗(yàn)。
使用說(shuō)明:
使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。?
1、稱(chēng)取土壤樣本 0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成細(xì)粉末,加入 450ul? 溶液A? 震蕩混勻。??
?*? 也可直接稱(chēng)取樣本 0.1-0.5g 于離心管( 建議使用 2ml? 圓底管) ,加入 450ul 溶液 A? 劇烈震蕩混勻 1-2min 至沒(méi)有固體塊。? 使用液氮研磨效果最佳。?
2 、加入50ul 溶液B? 充分顛倒混勻(? 不要?jiǎng)×艺鹗?,65℃水浴 6min,每2min充分顛倒混勻一次。?
3 、加入100ul? 溶液C? 充分顛倒混勻(? 不要?jiǎng)×艺鹗?,12000rpm離心10min?? 。?
4 、將上清轉(zhuǎn)移到新的離心管,12000rpm離心2min?? 。?
5 、在吸附柱中加入 200ul? 溶液D? ,將離心后的上清加入到帶有溶液 D? 的吸附柱中,用移液器吹吸幾次混勻,12000rpm離心1min。
6 、將收集管中的濾出液混勻后重新吸入吸附柱(? 必須),12000rpm離心1min。?
7 、倒掉收集管中的廢液,在吸附柱中加入漂洗液 500ul,12000rpm離心1min。?
8 、倒掉收集管中的廢液,重復(fù)步驟 7? 兩次(共漂洗三次)。?
9 、倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管,12000rpm離心2min?? 。?
10、拿出吸附柱在室溫干燥數(shù)分鐘(? 因季節(jié)及氣候等因素不等),或50℃干燥1min。?
11 、將吸附柱放入一個(gè)新的離心管中,加入 ul? 洗脫液(65? ℃預(yù)熱),12000rpm離心1min。?
12、將離心管中的液體重新加入到吸附柱中,12000rpm離心1min。離心管中即為土壤微生物 DNA 溶液。
13、若產(chǎn)物PCR 效果差,可以適當(dāng)稀釋 DNA產(chǎn)物,或添加1/10 體積的PCR 增強(qiáng)劑。
注意事項(xiàng):
1 、新鮮的土壤樣本會(huì)得到更高的產(chǎn)率,不同樣本在采樣前應(yīng)先查閱相應(yīng)的最佳保存條件。?
2 、若溶液中出現(xiàn)渾濁可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈,不會(huì)影響結(jié)果。?
3 、在需要吸取上清液的步驟中應(yīng)避免吸到沉淀,否則會(huì)堵塞吸附柱,并影響產(chǎn)物純度。?
4 、洗脫緩沖液的體積最好不少于 50ul ,體積過(guò)小會(huì)影響回收效率;建議使用試劑盒附帶的洗脫緩沖液,用水洗脫也會(huì)損失部分產(chǎn)物;DNA應(yīng)保存在-20? ℃避免反復(fù)凍融,以防降解。?
5 、若產(chǎn)物含有腐殖質(zhì)殘余則會(huì)嚴(yán)重影響 DNA的光吸收值,應(yīng)采取電泳檢測(cè)和分光光度計(jì)檢測(cè)相結(jié)合的方式鑒定。?
6 、液體試劑避免接觸皮膚,若意外接觸應(yīng)立即使用大量清水沖洗。
*Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途!