是否有現(xiàn)貨: | 是 | 認(rèn)證: | 飛凈 Phygene |
級(jí)別: | 超純、高純 | 用途: | 實(shí)驗(yàn)室 |
含量: | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 應(yīng)用: | 科學(xué)研究 |
型號(hào): | PH0421 | 規(guī)格: | 100ml |
商標(biāo): | 飛凈 Phygene | 包裝: | 瓶 |
產(chǎn)量: | 3566 |
TMB,即3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine,是辣根過(guò)氧化物酶的常用底物。在辣根過(guò)氧化物酶或其他適當(dāng)過(guò)氧化物酶的催化下,TMB 會(huì)產(chǎn)生可溶性藍(lán)色產(chǎn)物。藍(lán)色產(chǎn)物通??梢栽?370nm 或 nm 測(cè)定吸光度。加入**后,溶液呈黃色,此時(shí)可以在 450nm測(cè)定吸光度。本試劑盒常用于 ELISA 檢測(cè),也可以用于檢測(cè)血液或血紅蛋白等樣品中的過(guò)氧化物酶含量。用于 ELISA 檢測(cè)時(shí),每個(gè)樣品通常使用 0.2 毫升顯色液。
本顯色劑采用最新的顯色技術(shù),把所有的相關(guān)試劑全部配制在單一溶液中,僅由單一溶液組成,簡(jiǎn)化了操作步驟,使檢測(cè)更加穩(wěn)定可靠。
使用說(shuō)明:
1. 根據(jù)參考ELISA 試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟,在與辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體孵育后,用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。
2. 經(jīng)HRP標(biāo)記物孵育并充分洗滌后,酶標(biāo)板每孔加入 200ul TMB 顯色液。
3. 室溫避光孵育 3-30 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間(可長(zhǎng)達(dá) 24 小時(shí)),直至顯色至預(yù)期深淺。
4. 加入50 微升2M H2SO4 終止反應(yīng),隨后在 450nm測(cè)定吸光度。
常見(jiàn)問(wèn)題:
1. 背景顯色太深。
如果背景(沒(méi)有樣品的對(duì)照孔)顯色太深,一方面需考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進(jìn)行封閉,另一方面可以考慮縮短顯色時(shí)間,或降低二抗?jié)舛?。另外,選擇適當(dāng)強(qiáng)度的洗滌液,或延長(zhǎng)洗滌時(shí)間也會(huì)有所幫助。
2. 沒(méi)有顯色或顯色太弱。
a. 適當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。檢測(cè)二抗效果,滴一滴稀釋二抗在離心管內(nèi),檢測(cè)二抗是否可以被正常顯色。
b. 可以考慮使用更加靈敏的放大檢測(cè)體系,例如使用生物素檢測(cè)體系。
c. 可以適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間。
注意事項(xiàng):
1)TMB 對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
*Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
我們所提供的產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷、治療、食品或者化妝品等用途!